重组人生长激素、雌激素联合应用对去势大鼠剩余牙槽骨吸收的影响

时间: 2017-08-29 21:00:12 来源:未知 作者:admin 点击:41 次
  

                           作者:唐成芳 李晓红 郭三萍 肖卓 胡亚军

【摘要】    目的 观察重组人生长激素(r?HGH)、雌激素(estrone, E2)及两者联合应用对抗酒石酸酸性酶(TRAP)的活性及剩余牙槽骨骨形态计量学指标的影响,以明确两药单用及联合应用延缓骨质疏松(OP)所致的剩余牙槽骨吸收及其机制。方法 通过去除SD大鼠双侧卵巢,拔除单侧上颌磨牙,建立去势大鼠剩余牙槽骨动物模型,建模成功后分为模型组和治疗组,治疗组分别给予r?HGH、E2单用及联合治疗。药物治疗4周及8周后,检测各组血清TRAP含量及形态计量学指标的改变。结果 ①E2治疗组(ERT)、联合治疗组(Er?HGHT)TRAP含量低于模型组(P<0.05),差异有统计学意义;ERT、Er?HGHT两组TRAP含量基本相同,但都与r?HGH治疗组(r?HGHT)有统计学差异(P<0.05)。②去势可使大鼠剩余牙槽骨的骨小梁面积比减少,宽度减小,髓腔扩大,加速剩余牙槽骨的吸收。r?HGH、E2单用及两者联合应用4周及8周后可提高去势大鼠剩余牙槽骨的骨小梁宽度、骨小梁面积视野百分比,降低骨小梁间隙宽度。结论 r?HGH、E2单用及两者联合应用在一定程度上延缓骨质疏松大鼠剩余牙槽骨的快速吸收。

【关键词】  骨质疏松;重组人生长激素(r?HGH);雌激素(E2);剩余牙槽骨;抗酒石酸酸性酶;形态计量;大鼠

  The effect of estrogen and recombine human growth hormone on residual ridge reduction in osteoporotic rats

  ABSTRACT: Objective  To study the effect of estrogen, recombine human growth hormone and their combinations on residual ridge reduction in osteoporotic rats. Methods  Animal models were established by ovariectomy and exodontia on left partial maxillary, then were devided into osteoporosis group and treatment groups; treatment groups were given estrogen and recombine human growth hormone medicial alone and their recombinations. After treatment for 4 and 8 weeks with drugs, the effects of estrogen and recombine human growth hormone on the serum tartrate?resistant acid phosphatase level and bone histomorphometry changes in maxillary were observed in each group. Results  ① The serum tartrate?resistant acid phosphatase level was obvionsly lower in ERT group and Er?HGH group than in OP group (P<0.05). There was no difference in ERT group and Er?HGHT group, but had statistical difference with r?HGHT group (P<0.05). ② Rabecular width and trabecular area of residual ridge reduced, trabecular separation of residual ridge enlarged in osteoporosis rats, osteoporosis accelerated resorption of residual ridge. Using estrogen, recombine human growth hormone alone and their recombinations for 4 and 8 weeks can increase trabecular area and trabecular width, reduce trabecular separation of residual ridge in osteoporosis rats. Conclusion  Single use of estrogen and recombine human growth hormone and their recombinations can relieve resorption of residual ridge in some degree.

  KEY WORDS: osteoporosis; recombine human growth hormone; estrone; resorption of residual ridge; tartrate?resistant acid phosphatase; bone histomorphometry; rat

  剩余牙槽骨吸收是影响义齿固位、稳定和咀嚼功能最重要的因素之一,与骨质疏松(osteoporosis, OP)等全身疾病有一定相关性[1?2]。研究骨吸收抑制剂和骨形成刺激剂联合用药是防治OP患者牙槽骨吸收、阻止骨量持续丢失并促进骨形成、有效提高骨量的关键。刘慧珠、梁慧君[3?4]等研究表明:生长激素是绝经后骨代谢的影响因素之一,可能与雌激素(estrogen, E2)存在相互作用,为联合两药治疗OP提供了理论基础。故本实验通过建立OP及剩余牙槽骨动物模型,观察了联合应用重组人生长激素(recombine human growth hormone, r?HGH)、E2对去势大鼠剩余牙槽骨形态计量学及血清抗酒石酸酸性酶(tartrate?resistant acid phosphatase, TRAP)的影响。

  1  材料与方法

  1.1  实验动物的分组与模型建立  选用4月龄未交配的同批次Sprague Dawley(SD)雌性大鼠65只(西安交通大学医学动物实验中心提供的国家A级实验动物),体重250-280g。随机分为两组:去势组(ovariectomized rats, OVX)48只,假手术组(sham?ovariectomized rats, Sham?OVX)17只。OVX组大鼠全麻下摘除双侧卵巢,Sham?OVX组大鼠切除卵巢附近脂肪组织一块(术后第二天去势组2只大鼠死亡,剔出实验)。常规喂养8周后,分别随机抽取两组大鼠各5只处死,取左侧股骨近心端进行OP造模检测,在全麻下采用自制的开口器及牙挺拔除所有剩余大鼠左侧上颌磨牙(拔牙后,2个组各死亡1只大鼠,剔出实验)。建模成功后,将OVX组大鼠随机分为4组,每组10只:分别为骨质疏松组(OP)、雌激素治疗组(estrone replacement therapy, ERT)、重组人生长激素治疗组(recombine human growth hormone treatment group, r?HGHT)、雌激素生长激素联合治疗组(estrone and recombine human growth hormone treatment group, Er?HGHT);假手术对照组(Sham?OVX)大鼠11只。ERT组、Er?HGHT组于拔牙后第2天给予苯甲酸雌二醇皮下注射,0.1mL/kg,3日1次;r?HGHT组、Er?HGHT组每天给予皮下注射r?HGH,0.15u/kg,每日1次;其余各组每次注射等量的生理盐水。各组动物其他饲养条件均一致。

  1.2  取材及切片制作  给药4周及8周后各组随机抽取大鼠5只处死,经腹主动脉抽血,离心,测定血清TRAP含量;取左侧上颌骨,剔净骨周围的软组织,多聚甲醛固定3d,EDTA脱钙3周,流水冲洗,乙醇脱水、透明,常规石蜡包埋,沿牙长轴方向纵行切片,常规HE染色。

  1.3  检测指标

  1.3.1  OP模型检测  采用病理图像分析仪对去势8周所取左侧股骨骨组织形态计量学测量,计算平均骨小梁宽度(mean trabecular width, MTW)、平均骨小梁间距(mean trabecular separation, MTS)、平均骨小梁面积/视野面积百分比(trabecular bone volume, TBV)。

  1.3.2  血清TRAP的检测  采用对硝基苯基磷酸酯为底物的比色法测定各组TRAP含量。

  1.3.3  左侧上颌骨骨组织形态计量学的测量  应用病理图像分析仪进行骨组织计量学测定,计算MTW、MTS、TBV。

  1.4  统计学分析  应用SPSS12.0统计软件,对1.3.1数据采用t检验分析,1.3.2和1.3.3数据采用单因素方差分析,结果以均数±标准差(±s)表示,检验水准α=0.05。

  2  结果

  2.1  模型复制结果  见表1。OVX组大鼠MTS明显高于Sham?OVX组,OVX组MTW、TBV明显低于Sham?OVX组,统计学上有显著性差异(P<0.05)。

  表1  手术8周时OVX组及Sham?OVX组股骨组织切片骨计量学分析结果(略)

  Table 1  After operation 8 weeks, BMH result of the slices of thighbone in OVX and sham?OVX group

  *P<0.05 vs. sham?OVX

  2.2  药物治疗后大鼠血清中TRAP含量检测结果  见表2。用药4周、8周后,Sham?OVX组、ERT组、E r?HGHT组TRAP含量均低于OP组,有显著性差异(P<0.05);Er?HGHT组低于r?HGHT组,有显著性差异(P<0.05),与ERT组比较无差异(P>0.05)。各4周组血中TRAP浓度均大于8周组,但无显著性差异(P>0.05)。

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