再障患者B19病毒抗原检测及临床意义

时间: 2017-10-24 08:00:07 来源:未知 作者:admin 点击:25 次
                          作者:曹玉红 张国成 许东亮 

【关键词】  再生障碍性贫血
    关键词: 再生障碍性贫血;人细小病毒B19;免疫荧光技术 
    0 引言  
  人细小病毒B19(B19)是与人类疾病密切相关的小DNA病毒,与急性再生障性贫血(AAA)的关系屡有报道
[1] .为探讨B19抗原检测用于诊断AAA患者B19感染的价值及其临床意义,我们应用间接免疫荧光法(IIF)对21例AAA患儿骨髓进行B19抗原检测.
     
  1 对象和方法
     
  1.1 对象  病例组21例,为1998-01/1999-12在我院儿科和血液科住院的急性再障患者,年龄3~13岁,平均年龄6岁3月,均符合第6版《实用儿科学》再障诊断标准.所有患儿均采集新鲜骨髓液0.2mL于无菌肝素抗凝管,-20℃冰箱冻存,同时收集骨髓涂片,冷丙酮固定15min,-20℃密封保存待检. 
  1.2 方法
     
  1.2.1 IIF法检测再障患者骨髓涂片B19抗原 鼠抗B19病毒特异性mAb IgG(一抗)购自国际生化公司,羊抗鼠FITC标记的IgG(二抗)购自华美生物工程公司,试验步骤参见文献[2].①于待检骨髓涂片上加一抗放于湿盒内4℃过夜.②PBS-5g L-1 BSA液漂洗3次,每次5min,吹干.③加荧光二抗,湿盒内37℃保温30~60min.④PBS-5g L-1 BSA液漂洗2次,每次5min,用蒸馏水洗1次.⑤用500g L-1 缓冲甘油封片,荧光显微镜检.同时设立阳性对照及阴性对照.
    
  1.2.2 巢式PCR检测骨髓B19-DNA 巢式PCR所用引物、DNA提取、PCR反应具体步骤及结果观察参见文献[3].
     
  2 结果  
 
  21例AAA患者骨髓中有3例B19抗原阳性,其中1例呈弱阳性,另2例呈强阳性,黄绿色阳性荧光信号主要位于细胞膜及胞质周边,呈点状分布,阳性对照骨髓片呈阳性,阴性对照呈阴性;B19-DNA阳性7例;B19抗原阳性标本DNA亦阳性.B19抗原检测与巢式PCR相比,灵敏度为43%,特异度为100%,总符合率为81%,阳性预告值为100%,阴性预告值为78%.

联系我们Contact

企业QQ号码:4000290153
企业QQ咨询:
全国免费电话:400-029-0153
邮箱地址: 4000290153@b.qq.com
为了确保您的论文能够顺利通过审核,
请您在与客服老师沟通时务必要总结清楚您的论文要求。

南海代写论文网